Классическим методом определения качественного и количественного состава микрофлоры кишечника является бактериологическое исследование. Для этой цели пробу биоматериала (например: 1,0 г фекалий) предварительно разводят и полученные последовательные 10-кратные разведения засевают на чашки Петри с различными селективными, обогащенными и дифференциально-диагностическими средами, на которых выделяют и идентифицируют около 20 видов - представителей нормальной микрофлоры, как анаэробов, так и аэробов. Количественное содержание микроорганизмов в 1,0 г биоматериала определяют путем подсчета выросших на чашках колоний (из разных разведений) и полученное число умножают на соответствующее разведение. Результат выражают в КОЕ/г или lg КОЕ/г, и сравнивают с эталонной таблицей, в которой представлены количественные показатели фекальной микрофлоры различных возрастных групп.
В настоящее время разработаны и применяются различные биохимические и физико-химические экспресс-методы, позволяющие получать результат в день исследования. С помощью этих методов выявляют изменения в составе микрофлоры косвенным путем - по изменению состава соответствующих метаболитов. Например, уменьшение количества янтарной кислоты связано со снижением количества бифидобактерий, увеличение концентрации пропионовой кислоты - с избыточным размножением бактероидов.
Наиболее известными экспресс - методами являются газово-жидкостная хроматография, применяемая для определения в фекалиях летучих веществ - летучих жирных кислот и ароматических соединений (фенолы, индолы) и жидкостная хроматография, позволяющая определять нелетучие соединения, такие как простые и сложные амины, фенилпропионовую кислоту, карбоновые кислоты и другие метаболиты. Эти методы не позволяют идентифицировать содержащиеся в исследуемом материале анаэробы до вида.
Экспресс - методы пригодны для массовых обследований (скрининга), их проводят на специальной аппаратуре. Их результаты, обычно, сопоставимы с данными, полученными бактериологическим методом. Во многих странах экспресс - методы широко применяются совместно с бактериологическим методом или заменяя его.
В Российской Федерации основной метод исследования нормальной микрофлоры - бактериологический. Экспресс - методы применяют в основном при научных исследованиях и сравнительно редко на практике. В последнее годы внедряется в практику ПЦР.
Врач бактериолог отделения
сан-бак исследований
микробиологической лаборатории
ФБУЗ «ЦГиЭ в РМЭ» Ковтанюк Н.А.